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血液組織DNA提取試劑盒(DNeasy Blood & Tissue Kit)技術(shù)簡介

發(fā)布時(shí)間:2015-7-14 15:21:17??????瀏覽次數(shù):
 簡介:

從動(dòng)物血液和組織、細(xì)胞、酵母、細(xì)菌或者病毒中純化總DNA

1.為各種類型樣本提供標(biāo)準(zhǔn)化的純化方法

2.即使是特殊類型起始樣本也可以獲得高產(chǎn)量DNA

3.高品質(zhì)DNA

4.經(jīng)過優(yōu)化的操作方法適合處理多種起始樣本

5.可選擇離心柱方式或96孔板高通量方式

DNeasy Blood & Tissue Kit采用基于硅膠膜技術(shù)的離心柱或96孔板方式快速方便的純化DNA。大多數(shù)樣本可直接用蛋白酶K消化處理,無需機(jī)械破碎,減少了手動(dòng)操作時(shí)間。為特殊樣本提供優(yōu)化的純化方法,獲得高重復(fù)性、高純度的DNA,用于生物研究、基因型分析和獸醫(yī)病理研究。DNA純化流程可以使用DNeasy Blood & Tissue Kit,在QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀上自動(dòng)化進(jìn)行。

詳細(xì)信息:

性能

高效的DNeasy Blood & Tissue操作流程能夠從動(dòng)物血液和組織樣本中純化大量的總DNA。優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)方案可確保非標(biāo)準(zhǔn)樣本的高產(chǎn)量,如動(dòng)物毛發(fā)和培養(yǎng)細(xì)胞、固定的組織,或者革蘭氏陽性和陰性細(xì)菌。獨(dú)特的在線實(shí)驗(yàn)方案參考文庫,可從酵母、昆蟲、毛發(fā)和其他類型樣本中純化DNA。

使用DNeasy Blood & Tissue Kits從動(dòng)物組織中純化的DNA產(chǎn)量

樣本來源

樣本量

DNAμg

哺乳動(dòng)物血液

100 μl

3–6

鳥類血液

5 μl

9–40

HeLa細(xì)胞

2 x 106

15–25

肝臟

25 mg

10–30

25 mg

15–30

腎臟

25 mg

15–30

脾臟

10 mg

5–30

小鼠尾

1.2 cm(尾部)

10–25

大鼠尾

0.6 cm(尾部)

20–40

豬耳

25 mg

10–30

馬毛

10 根毛發(fā)

2–4

魚鰭

20 mg

10–20

魚卵(鯖魚)

10 mg

5–10

DNeasy Blood & Tissue Kits簡化了從多種樣本類型中純化DNA的流程,包括在生命科學(xué)、獸醫(yī)學(xué)和基因分型研究應(yīng)用中常見的動(dòng)物種類。純化得到的DNA不含PCR抑制劑,能在標(biāo)準(zhǔn)多重real-time PCR中進(jìn)行靈敏的檢測(cè)。DNeasy Blood & Tissue Kits確保了可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,從轉(zhuǎn)基因小鼠的實(shí)驗(yàn)室分析到家畜的育種項(xiàng)目和種系基因分型研究??梢杂?/span>DNeasy 96 Blood & Tissue Kit方便地?cái)U(kuò)大常規(guī)的檢測(cè)應(yīng)用的規(guī)模。

原理

DNeasy Blood & Tissue Kit適用于從不同的樣本中,包括新鮮或冷凍的動(dòng)物組織和細(xì)胞、血液或者細(xì)菌,快速純化總DNA(如,基因組、線粒體和病原體等)。

DNeasy膜整合了硅膠膜的結(jié)合特性,經(jīng)簡單顯微離心技術(shù)或者QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System處理即可。在高濃度離液鹽的環(huán)境中,DNA吸附在DNeasy膜上,可以除去溶液中水合分子的水分。DNeasy Blood & Tissue操作流程中設(shè)計(jì)的緩沖液條件,旨在使DNA特異性吸附到硅膠膜上,并且優(yōu)化去除污染物和酶抑制劑。

純化過程不需要苯酚或氯仿抽提或乙醇沉淀,僅涉及少量手工步驟。這使得DNeasy Blood & Tissue Kits非常適合同時(shí)處理多個(gè)樣本。對(duì)于高通量的應(yīng)用,DNeasy 96 Blood & Tissue Kit能夠同時(shí)處理96192個(gè)樣本。

操作流程

可靠的硅膠膜技術(shù),利用便捷的離心柱或96孔板形式,確保了快速可重復(fù)的DNA純化,不再需要有機(jī)抽提和乙醇沉淀(參見DNeasy Mini and 96 procedures)。樣本首先用蛋白酶K裂解。調(diào)整緩沖條件,以提供最佳的DNA結(jié)合條件并將裂解物上樣到DNeasy Mini離心柱或DNeasy 96孔板上。在離心過程中,DNA選擇性地結(jié)合到DNeasy膜上,污染物通過。余下的污染物和酶抑制劑將在兩個(gè)高效的洗滌步驟中被去除。然后,用水或緩沖液將DNA洗脫,待用。  

DNeasy Mini離心柱預(yù)裝在收集管中,并且單獨(dú)封存,確保方便和安全。使用DNeasy Mini離心柱的純化過程可在QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀上自動(dòng)進(jìn)行。DNeasy 96 Blood & Tissue Kit可使用QIAGEN 96-Well-Plate Centrifugation System96孔板形式進(jìn)行高通量處理。

應(yīng)用

DNeasy Blood & Tissue Kits提供高品質(zhì)DNA,可直接用于多種下游分析,包括:

1.生命科學(xué)研究 

2.家畜育種

3.種系基因分型研究 

4.獸醫(yī)病理分析研究 

5.常規(guī)的應(yīng)用檢測(cè) 

技術(shù)參數(shù):

特點(diǎn)

參數(shù)

Applications

PCR, real-time PCR, genotyping

Elution volume

100–200 μl

Format

96-well plate, spin column

Main sample type

Blood, tissue

Processing

Manual

Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein

DNA

Sample amount

100 μl/25 mg

Technology

Silica technology

Time per run or per prep

20 minutes – 1 hour

Yield

6 μg/30 μg

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